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人骨骼肌細(xì)胞永生化

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2024-02-07

所屬分類人源細(xì)胞系

報(bào)價(jià)1500

產(chǎn)品描述:人骨骼肌細(xì)胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品:動(dòng)物血小板線粒體粗提分離試劑盒
動(dòng)物血小板活性線粒體分離試劑盒
動(dòng)物血小板高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
動(dòng)物全血線粒體粗提分離試劑盒
動(dòng)物全血活性線粒體分離試劑盒

產(chǎn)品概述

人骨骼肌細(xì)胞永生化

細(xì)胞基本屬性:

產(chǎn)品名稱

人骨骼肌細(xì)胞永生化

組織來(lái)源

正常肌肉組織

種屬

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞代數(shù)

10代以內(nèi)

細(xì)胞形態(tài)

長(zhǎng)梭狀細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格

1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

凍存條件

無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞詳細(xì)介紹:

細(xì)胞別稱 

背景簡(jiǎn)介   骨骼肌細(xì)胞(Skeletal   muscle cells)是人和動(dòng)物體內(nèi)大的細(xì)胞之一,它們是由成肌細(xì)胞(Myoblasts)融合而來(lái)的多核細(xì)胞,故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程,并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與,包括phosphatidylinositol 3-kinase,calcineurin,STAT3MAPK等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過(guò)程的有效的模型。   該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

細(xì)胞鑒定   肌動(dòng)蛋白(α-actin)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于90%

支原體檢測(cè)   無(wú)

培養(yǎng)基   人骨骼肌細(xì)胞永生化專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件   氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)

發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主

 

 

 


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二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。

(1)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。

(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

(3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。

(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。

QQ截圖20240105153042.png

公司正在出售的產(chǎn)品:

血液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

動(dòng)物軟組織可溶性膜蛋白(純提)制備試劑盒

體液HPV6HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞CASPASE-9蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

血液高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒

石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)

組織EPHB4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

端粒酶活性TRAP實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒

人血液轉(zhuǎn)(TRANSFERRIN)免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒

純化微粒體磷脂酶D2Phospholipase D2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞丙二醛(MDA)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C8DBF)活性

線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2ACE2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

MEM培養(yǎng)基

孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體

鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體

親環(huán)素蛋白ppil4抗體

IQCG蛋白抗體

細(xì)胞分化蛋白質(zhì)RCD1抗體

Wnt蛋白家族7B抗體

跨膜γ羧基酸蛋白4抗體

APC標(biāo)記人CD24單克隆抗體

人骨骼肌細(xì)胞永生化鋅指蛋白70抗體


傳代培養(yǎng)操作步驟:

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。

(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。

(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。

(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。

(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。



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