傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

XWLC-05云南宣威肺腺癌細(xì)胞系

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CL-0196RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 FITC FITC標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml

GIRK2： G蛋白激活內(nèi)流通道蛋白2抗體 A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株 Human

HUF Pellet 人子宮成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL 人結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA 試劑盒 AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml

GRB10： 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體 人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)

AML-193(人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗親和素 2ml

小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 ACV-A(Human Activin A)  人活化素A 96T

Phospho-NFKBIA (Tyr42)： 0酸化IKB α抗體 Mv.1.Lu細(xì)胞，貂肺上皮細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,CW-2細(xì)胞 CM-H093人顱蓋造骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠腎損傷分子1(Kim1)ELISA試劑盒 NRG-1(human Neuregulin 1)  人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1 96T

phospho-NFKBIA(Tyr305)： 0酸化IKB alpha抗體 狗間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪DMSC-ad

WEHI-231小鼠B淋巴細(xì)胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 CXCL16  大鼠CXC趨化因子配體16 96T

XWLC-05云南宣威肺腺癌細(xì)胞系IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人preptin ELISA 試劑盒 SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受體5抗原 0.5mg

Interferon alpha 6： 干擾素α6抗體 牛腎細(xì)胞;MDBK

RH-35細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞 HeLa(細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1036 人PL7抗體/抗蘇酰NA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒 STAT1(signal transducers and activators of transcription 1) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原 0.5mg

CD18： 整合素β2/Integrin β2抗體 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] 人PL12抗體/抗酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA 試劑盒 phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原 0.5mg