hESC（H9）人胚胎干細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FMDV Polyprotein (3D polymerase)： 口蹄疫病毒 0.2ml

細胞色素P450單氧化酶抗體 615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FBX09： F-box蛋白9抗體 人肺成纖維細胞;HFL1

GP2-293細胞，人胚腎上皮包裝細胞 大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1),HBZY-1細胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 標簽) 大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16)  人CXC趨化因子配體16 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肺血管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 RBP  大鼠醇結(jié)合蛋白 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 NCI-H460[H460]細胞，大細胞肺癌細胞 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,H4細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA 試劑盒 CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3)  人CXC趨化因子受體3 96T

hESC（H9）人胚胎干細胞C22orf28： 22號染色體開放閱讀框28抗體 角膜上皮細胞培養(yǎng)基CEpiCM-prf

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA 試劑盒 UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 0.5mg

C14orf94： 14號染色體開放閱讀框94抗體 NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人淋巴血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL 人(Amylase)ELISA 試劑盒 GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原 0.5mg

HDDC3： 四0酸鳥苷水解酶抗體 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 白血病原髓細胞，HL-60細胞 Dami(巨核細胞白血病細胞)